2000年出演电视剧《卧虎藏龙》饰演玉娇龙。

2001年出演电视剧《射雕英雄传》饰演穆念慈。2001年与赵文卓、何润东主演电视剧《风云雄霸天下》和《风云必胜》饰演明月和第二梦。

2002年与林心如、谭耀文主演电视剧《半生缘》，扮演风尘女子顾曼璐。

2002年客串出演《还珠格格Ⅲ》饰演江南名妓夏盈盈。

2004年在电影《姐姐词典》饰演牛红梅，获第10届中国电影表演艺术学会奖“金凤凰奖”。

2006年，与陈建斌、马伊琍主演中国内地电视剧《乔家大院》，此剧曾被香港无线电视、台湾、韩国播映，并获第23届中国电视金鹰奖优秀长篇电视剧奖和2007年第26届中国电视剧飞天奖优秀长篇电视剧一等奖。

2007年与黄磊主演《四世同堂》，《四世同堂》是蒋勤勤产后首部作品，剧中她饰演祁家长孙儿媳韵梅，并自化妆，感受她饰演角色的温润贤良。